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乙醇酸氧化酶测试盒的检测原理是什么-信帆生物为您答疑解惑

发布时间:2019-08-21   点击次数:41次

乙醇酸氧化酶测试盒的检测原理是什么-信帆生物为您答疑解惑

乙醇酸氧化酶(glycollic oxidase, GO)试剂盒

测定意义

乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代谢中的关键酶,也是光下合成草酸的关键酶,

它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。

测定原理

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙,在

324nm 有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿。

试剂组成和配制

提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 35mL×1 瓶,4℃保存。

试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存,临用前加 10mL 双蒸水溶解;用不完的试剂分装后-20

保存,禁止反复冻融。

试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。

酶液提取

按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL

提取液),进行冰浴匀浆。12000g, 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

 

注意事项

1。 测定之前进行预实验,若吸光值较高,请将样品用提取液进行适当的稀释再测定,并在

计算公式中乘以稀释倍数。2. 色素含量较高的样品,可在提取酶时加活性炭吸附。

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