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信帆生物销售黄嘌呤氧化酶

发布时间:2019-11-18   点击次数:50次

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测定意义:

XODEC 1.17.3.2催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子,是活性氧主要来源之一;同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的心,肺,肝脏等组织中,当肝功能受损时,XOD大量释放到血清中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。

测定原理:

XOD催化黄嘌呤产生尿酸,尿酸在290nm下有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:100mL×1瓶,4保存;

试剂一:30mL×1瓶,4保存;

试剂二:粉剂×2瓶,4保存。

粗酶液提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备

收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次)8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆;8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

操作步骤:

  1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至2940nm,蒸馏水调零。

2XOD检测工作液的配制:用时在每瓶试剂二中加入15mL试剂一,充分混匀,待用。

3、测定前将XOD检测工作液在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上。

4、在EP管中加入10μL样本和250μL工作液,立即混匀并计时,立即取200µL转移至微量石英比色皿或96孔板中,记录290nm下初始吸光值A11min后的吸光值A2。计算ΔAA2-A1

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