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信帆生物低价销售多酚氧化酶!

发布时间:2019-12-02   点击次数:112次

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测定意义:上海11选5                          

PPOEC1.10.3.1)主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化产生醌,从而引起褐化,与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。

测定原理:

PPO能够催化邻苯二酚产生醌,后者在525nm有特征光吸收。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液×1瓶,4保存;

试剂一×1瓶,4保存;

试剂二×1瓶,4保存;

试剂三×1瓶,4保存;

粗酶液提取:

1收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次);8000g 4离心10分钟,取上清,置冰上待测。

2、称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g 4离心10分钟,取上清,置冰上待测。

测定步骤:

  1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至525nm,蒸馏水调零。
  2. 样本测定(在EP管中依次加入下列试剂)

试剂名称(μL

测定管

对照管

试剂一

200

100

试剂二

50

50

样本

50

 

煮沸的样本

 

50

37℃(哺乳动物)25(其它物种)中准确水浴10min后,迅速放入冰浴中冷却

试剂三

100

100

充分混匀,5000g,常温离心10min,收集上清,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中525nm处检测测定管和对照管吸光度,计算ΔA=A测定-A对照。

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