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信帆生物销售植物α-淀粉酶!

发布时间:2019-12-02   点击次数:65次

上海11选5XINFANSHENGWUXIAOSHOUBUZHIWUα-DIANFENMEI!

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测定意义:

淀粉酶负责水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。

测定原理:

还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。β-淀粉酶不耐热,在70钝化15min,从而测定α-淀粉酶活性。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

试剂一:25mL×1瓶,常温保存,若有黄色晶体析出,需加热溶解后再用;

试剂二:20mL×1瓶,4保存。

粗酶液提取:

称取约0.1g样本,加0.8mL蒸馏水匀浆;匀浆后在室温下放置提取15min,每隔5min振荡1次,使其充分提取;3000g,常温离心10min,吸取上清液并且加蒸馏水定容至10 mL,摇匀,即为淀粉酶原液。

操作步骤和加样表(在1.5mLEP管中依次加入下列试剂)

1β-淀粉酶灭活:

试剂(μL

对照管

测定管

α‑淀粉酶原液

250

250

70水浴15min左右冷却

2、加入试剂一并且保温:

试剂一

500

 

将以上对照管、测定管和试剂二置于40恒温水浴中保温10min左右

3、准确反应5min

试剂二

250

250

40恒温水浴中准确保温5min

4、加入试剂一,并且混匀

试剂一

 

500

混匀,室温静置10min蒸馏水调零,540nm处读取对照管和测定管吸光度,分别记为A1A2

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