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信帆生物提供PCR技术服务,PCR实验代测

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信帆生物提供PCR技术服务,PCR实验代测
实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法是检测细胞、组织或微生物中基因表达变化,如不同药物浓度处理后相关基因表达水平高低的常用手段之一,与常规PCR相比,实时荧光定量PCR具有极高的灵敏度、高度的重复性和极佳的特异性,且后续处理无EB等有害物质的污染,已成为现阶段国际公认的核酸分子定量检测的金标准,在基因表达研究和临床疾病检测等领域

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信帆生物提供PCR技术服务,PCR实验代测

逆转录PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。

 

由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成。

 

随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶H降解,留下互补DNA。

 

RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术,可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断,并且可以用于定量监测某种RNA的含量。检测基因表达的方法,参见Northern Blot法。


RT-PCR的关键步骤是在RNA的反转录,要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。常用的反转录酶有两种,即鸟类成髓细胞性白细胞病毒(avian myeloblastosis virus,AMV)反转录酶和莫罗尼鼠类白血病病毒(moloney murine leukemia virus,MMLV)反转录酶。


在完成逆转录过程之后,通过PCR进行定量分析的时候,随着技术的发展,real-time PCR(实时荧光PCR)或ddPCR(数字PCR)技术也被用来做定量分析,它们比普通PCR进行定量分析时灵敏度更高,定量更精确。

oligo:多聚体,相当于mRNA引物
AMV RT:禽类成髓细胞瘤病毒逆转录酶
MMLV RT:莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶
dNTPs:脱氧核苷酸
RNase:RNA水解酶
PCR Buffer:RT-PCR缓冲液
MgCl2:2价镁离子

 

信帆生物提供PCR技术服务,PCR实验代测

一、服务介绍

实时PCR(real-time PCR),属于定量PCR(Q-PCR)的一种,以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。定量方式包括绝对定量和相对定量。可检测mRNA,microRNA,lncRNA和DNA水平的基因拷贝数变化。

 

二、服务流程

1、引物设计与合成

2、DNA/RNA抽提

3、反转录(针对RNA)

4、上机定量分析

 

三、客户提供

1、全血、组织或细胞。细胞:细胞数>107,组织:总量>200mg,DNA或RNA样品:总量>5ug

2、引物,或由信帆生物提供。

3、基因信息:目的基因名称、物种和序列(或GenBank Accession Number)。

 

四、交付内容

实验报告:详细操作步骤

原始数据:溶解曲线图,扩增曲线图,ct值

 

 

信帆生物公司主要代理产品:
ELISA试剂盒:进口ELISA试剂盒,国产ELISA试剂盒,人elisa试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒等。
培养基:微生物培养基,显色培养基,BD培养基,gibco培养基等。
血清:胎牛血清,人血清,动物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原装血清 。
生物试剂:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等进口试剂。
标准品对照品:进口对照品,进口对照药材,进口标准品.
抗体:一抗,二抗,流式抗体等。
放免试剂盒:进口放免试剂盒,国产放免试剂盒,进口美国凤凰等知名品牌放免试剂盒。
实验室代测服务:放免代测,WB实验,免疫组化代测,荧光定量PCR代测,病理细胞染色代测,生化实验代测等。

 

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